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Sequence 1
游戲一開始展示了一段CG，回顧了前兩部的劇情，接著畫面切換到戰(zhàn)場。
連續(xù)按左鍵可以用袖刀進(jìn)行攻擊，最后畫面回到了前作結(jié)束時的場景。
離開房間后遇見Mario，按住E鍵使用鷹眼可以看到墻上通往上層的路線。按右鍵小跑，右鍵加空格沖刺，爬上去后與Mario會合，然后跟隨他離開。
在人群中按shift可以推開行人，遇到敵人時按左鍵進(jìn)行攻擊，右鍵進(jìn)行防御，在敵人攻擊的瞬間按右鍵加左鍵進(jìn)行防守反擊。
與Mario一路飛檐走壁，爬上一座塔樓后將蘋果交給他，然后兩人一同跳下去。
載入后抵達(dá)城外，騎馬跟隨Mario，進(jìn)城后遇到妹妹，簡單交談后前往地圖上的三個任務(wù)點，分別是幫助一位女士搬運東西。
幫助Mario的手下抓住馬，跑到馬的側(cè)面，按shift可以騎上馬，然后將馬騎到目標(biāo)點交給Mario的手下。
找到工匠修理加農(nóng)炮，然后對遠(yuǎn)處的目標(biāo)進(jìn)行射擊練習(xí)，shift用于瞄準(zhǔn)，右鍵射擊。
完成三個任務(wù)后前往Mario的住所，簡單交代后上二樓自己的房間，洗澡后和女子共度一夜，早晨聽到炮聲，隨后一顆炮彈飛進(jìn)房間。
走出室外，看到城市正遭受攻擊，炮彈在空中四處飛舞。跳下樓后騎馬趕到城墻下，通過梯子爬上城墻。
盡快趕到加農(nóng)炮處，在城市被摧毀前摧毀敵人的大炮。左側(cè)的加農(nóng)炮損壞后轉(zhuǎn)向右側(cè)的使用。不久敵人攻上城墻，前去支援友軍。
之前遇到普通步兵，解決后出現(xiàn)拿斧子的重型兵，他們能防御普通攻擊，需先按空格踢一腳再用武器攻擊以消滅。
消滅所有敵人后，城市大門被炸開，Mario和最初遇到的那名男子進(jìn)來，他拿到了蘋果并準(zhǔn)備殺掉Mario。Ezio迅速趕去，但未能阻止。
Mario被殺，Ezio也中彈從屋頂摔下。
被部下救起后與他們一同殺到Mario的房子，發(fā)現(xiàn)Ezio的妹妹在屋前被襲擊，上前營救妹妹，隨后跟隨她進(jìn)入家的暗門，通過地下通道與平民一同逃離。
逃出后，Ezio與家人分別，獨自前往羅馬，但因傷勢嚴(yán)重在路上從馬上摔下。
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